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    關于3M測試片的接種的使用及判讀方法

    2021-06-22 09:45:01

    3M測試片是美國3M公司研發的一種快速測試片。3M測試片相比傳統測試方法,大大的縮短了檢測工作時間,省略了培養基配制、高壓滅菌、平板傾注等繁瑣步驟,工作效率大幅提高,并且由于品質的穩定均一,克服了傳統測試方法存在的使用培養基批次不同、配置條件不同、配置人員不同而導致的差異性。3M快速測試方法得到了包括AOAC在內的多個機構的認證,在全球許多地方已獲官方機構的正式批準,從而可以確保檢測結果的可靠性和世界各地的廣泛認可。

    3M測試片包括菌落總數、大腸菌群、大腸菌群/大腸桿菌、金黃色葡萄球菌霉菌和酵母菌、環境李斯特等很多種類。

    3M菌落總數測試片

    1、操作方法

    ①未開封時,置于≤8℃冷藏,注意外包裝上的保存期限,打開包裝時,應在室溫條件下。已開封的,應用壓條或膠帶封口后,置于室溫,一個月內用完。

    ②稱取樣品置于無菌均質袋或均質杯中,加入無菌稀釋液攪拌或均質樣品,并用稀鹽酸或稀氫氧化鈉調pH至6.5~7.2。

    注意:無菌稀釋液不可使用含有檸檬酸鹽、酸性亞硫酸鹽或硫代硫酸鹽的緩沖液,這些稀釋液會阻礙細菌的生長。

    ③將測試片置于平坦表面處,保持水平,揭開上層膜,移液器或滴管吸1ml樣液垂直滴加在測試片的正中央。然后將上層膜慢慢落下,盡量不要出現氣泡,切勿向下滾動上層膜。

    ④將壓板的圓形內凹面朝下,放置在上層膜的正中央,然后輕輕壓下,使樣液均勻覆蓋于圓形的培養基面積上,切不可扭轉壓板。

    ⑤拿起壓板,靜置1min以上等待培養基凝固。然后測試片的透明面朝上,最多可疊放20片,置于36℃培養48小時,并保持培養箱的濕度。

    2、判讀方法

    ①菌落總數測試片內,含有一種紅色指示染劑,可以使菌落呈現紅色便于計數,計算所有紅色菌落,不論大小及顏色深淺。

    ②測試片菌落計數的適宜計數范圍是25~250。

    ③測試片的計數面積約為20cm2。每一個黃色方框的面積是1cm2。當菌落總數超過250個時,為了估計菌落數,可以選擇其中一個或幾個有代表性的小方框(1cm2)。計算平均菌落數,然后再乘以20可得到測試片上的菌落數。

    ④當測試片上的菌落太多而無法進行計數時,記錄為“TNTC”。

    ⑤有很高數量的菌落,使整個生長區域變成粉色,或僅僅在生長邊緣區域觀察到單個菌落,記錄為“TNTC”。

    ⑥有很高的菌落數量,并且有時菌落會出現分布不均勻的情況,記錄為“TNTC”。

    ⑦可以看到直徑較大的菌落,并且可以計數,但是仔細觀察時,會發現非常密集非常細小的菌落分布在計數區域內,此時記錄為“TNTC”。

    ⑧很少數量的菌種,會將測試片上的培養基液化,在計數區域內出現一個粉紅色的液化區,此時不要記錄液化區內的紅點,應選擇沒有被液化區域內的菌落進行計數,選取沒有液化部分的幾個有代表性的小方格(1cm2)。計算平均菌落數,然后乘以20。得到結果。

    ⑨注意和樣品殘渣顆粒進行區。有些樣品中會含有一些紅色的殘渣顆粒,菌落應該是紅色規則的圓形,而顆粒的形狀是不規則的。如果樣品以紅色顆粒為主(比如辣椒粉),這類樣品的菌落總數檢測,不宜采用3M菌落總數測試片。


    3M大腸桿菌/大腸菌群測試片


    1、操作方法 

    操作方法與3M菌落總數測試片基本相同,只是不需要壓板,直接把1ml樣液加到中間紅色圓形區域內,然后將上層膜輕輕放下,盡量不要產生氣泡。然后可以輕輕的轉動一下紙片,使樣液可以均勻地分布在中間紅色的圓形區域內。

    2、判讀方法

    大腸菌群在紙片上呈現紅色菌落,緊貼著菌落有氣泡,大腸桿菌在紙片上呈藍色菌落緊貼菌落有氣泡。此時應注意區分只有紅色或藍色菌落而沒有氣泡的情況,或者氣泡不是緊貼著菌落,或者只有氣泡無菌落生長,都不應列入計數范圍。此外還應區別樣品殘渣和目標菌落。



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