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關(guān)于3M測試片的接種的使用及判讀方法

2021-06-22 09:45:01

3M測試片是美國3M公司研發(fā)的一種快速測試片。3M測試片相比傳統測試方法,大大的縮短了檢測工作時(shí)間,省略了培養基配制、高壓滅菌、平板傾注等繁瑣步驟,工作效率大幅提高,并且由于品質(zhì)的穩定均一,克服了傳統測試方法存在的使用培養基批次不同、配置條件不同、配置人員不同而導致的差異性。3M快速測試方法得到了包括AOAC在內的多個(gè)機構的認證,在全球許多地方已獲官方機構的正式批準,從而可以確保檢測結果的可靠性和世界各地的廣泛認可。

3M測試片包括菌落總數、大腸菌群、大腸菌群/大腸桿菌、金黃色葡萄球菌霉菌和酵母菌、環(huán)境李斯特等很多種類(lèi)。

3M菌落總數測試片

1、操作方法

①未開(kāi)封時(shí),置于≤8℃冷藏,注意外包裝上的保存期限,打開(kāi)包裝時(shí),應在室溫條件下。已開(kāi)封的,應用壓條或膠帶封口后,置于室溫,一個(gè)月內用完。

②稱(chēng)取樣品置于無(wú)菌均質(zhì)袋或均質(zhì)杯中,加入無(wú)菌稀釋液攪拌或均質(zhì)樣品,并用稀鹽酸或稀氫氧化鈉調pH至6.5~7.2。

注意:無(wú)菌稀釋液不可使用含有檸檬酸鹽、酸性亞硫酸鹽或硫代硫酸鹽的緩沖液,這些稀釋液會(huì )阻礙細菌的生長(cháng)。

③將測試片置于平坦表面處,保持水平,揭開(kāi)上層膜,移液器或滴管吸1ml樣液垂直滴加在測試片的正中央。然后將上層膜慢慢落下,盡量不要出現氣泡,切勿向下滾動(dòng)上層膜。

④將壓板的圓形內凹面朝下,放置在上層膜的正中央,然后輕輕壓下,使樣液均勻覆蓋于圓形的培養基面積上,切不可扭轉壓板。

⑤拿起壓板,靜置1min以上等待培養基凝固。然后測試片的透明面朝上,最多可疊放20片,置于36℃培養48小時(shí),并保持培養箱的濕度。

2、判讀方法

①菌落總數測試片內,含有一種紅色指示染劑,可以使菌落呈現紅色便于計數,計算所有紅色菌落,不論大小及顏色深淺。

②測試片菌落計數的適宜計數范圍是25~250。

③測試片的計數面積約為20cm2。每一個(gè)黃色方框的面積是1cm2。當菌落總數超過(guò)250個(gè)時(shí),為了估計菌落數,可以選擇其中一個(gè)或幾個(gè)有代表性的小方框(1cm2)。計算平均菌落數,然后再乘以20可得到測試片上的菌落數。

④當測試片上的菌落太多而無(wú)法進(jìn)行計數時(shí),記錄為“TNTC”。

⑤有很高數量的菌落,使整個(gè)生長(cháng)區域變成粉色,或僅僅在生長(cháng)邊緣區域觀(guān)察到單個(gè)菌落,記錄為“TNTC”。

⑥有很高的菌落數量,并且有時(shí)菌落會(huì )出現分布不均勻的情況,記錄為“TNTC”。

⑦可以看到直徑較大的菌落,并且可以計數,但是仔細觀(guān)察時(shí),會(huì )發(fā)現非常密集非常細小的菌落分布在計數區域內,此時(shí)記錄為“TNTC”。

⑧很少數量的菌種,會(huì )將測試片上的培養基液化,在計數區域內出現一個(gè)粉紅色的液化區,此時(shí)不要記錄液化區內的紅點(diǎn),應選擇沒(méi)有被液化區域內的菌落進(jìn)行計數,選取沒(méi)有液化部分的幾個(gè)有代表性的小方格(1cm2)。計算平均菌落數,然后乘以20。得到結果。

⑨注意和樣品殘渣顆粒進(jìn)行區。有些樣品中會(huì )含有一些紅色的殘渣顆粒,菌落應該是紅色規則的圓形,而顆粒的形狀是不規則的。如果樣品以紅色顆粒為主(比如辣椒粉),這類(lèi)樣品的菌落總數檢測,不宜采用3M菌落總數測試片。


3M大腸桿菌/大腸菌群測試片


1、操作方法 

操作方法與3M菌落總數測試片基本相同,只是不需要壓板,直接把1ml樣液加到中間紅色圓形區域內,然后將上層膜輕輕放下,盡量不要產(chǎn)生氣泡。然后可以輕輕的轉動(dòng)一下紙片,使樣液可以均勻地分布在中間紅色的圓形區域內。

2、判讀方法

大腸菌群在紙片上呈現紅色菌落,緊貼著(zhù)菌落有氣泡,大腸桿菌在紙片上呈藍色菌落緊貼菌落有氣泡。此時(shí)應注意區分只有紅色或藍色菌落而沒(méi)有氣泡的情況,或者氣泡不是緊貼著(zhù)菌落,或者只有氣泡無(wú)菌落生長(cháng),都不應列入計數范圍。此外還應區別樣品殘渣和目標菌落。



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